Obiettivi
Eseguire nuovi studi chi evidenziano tutti i benefici che l’olio extravergine di oliva di alta qualità può dare alla salute, in particolare nella prevenzione dei tumori del colon e del fegato e nel controllo del diabete e del colesterolo. Test biologici condotti sui campioni di olio (Premium e Standard) scelti nel WP 3 permetteranno di:
- valutare se i polifenoli dell’olio extravergine di oliva sono assorbiti dagli enterociti (cellule Caco-2) e verificare la loro capacità antiossidante sulle cellule intestinali Caco-2 ed epatiche HepG2;
- studiare l’effetto dei polifenoli sulla produzione di ApoA1 e ApoB nelle cellule HepG2 e Caco-2 e analizzare le LDL di ox e della produzione di OLR-1 nelle cellule HepG2;
- indagare sugli effetti sulla salute di oli selezionati (in particolare per l'associazione esistente tra gli acidi grassi e il diabete), sulla funzione secretoria e sulla sopravvivenza delle cellule beta pancreatiche;
- valutare una possibile interferenza degli acidi grassi sulle azioni pancreatiche dell'ormone incretinico (GLP-1 e suoi analoghi).
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DETO - Università di Bari Aldo Moro
Università di Milano
Task 6.1 Assorbimento di polifenoli EVO attraverso le cellule Caco-2 intestinali umane
Cellule di Caco-2 (cellule intestinali umane dell’adenocarcinoma del colon) verranno impiantate su supporti filtranti permeabili in policarbonato (Transwell, Costar) e utilizzate per esperimenti di assorbimento. I polifenoli assorbiti saranno misurati mediante HPLC / ESI / MS / MS. L'analisi permetterà anche di rilevare se si sono verificate modifiche metaboliche strutturali a carico delle stesse cellule.
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Università di Milano
Task 6.2 Caratterizzazione delle proprietà antiossidanti dei polifenoli EVO sulle cellule epatiche HepG2 umane
L'attività antiossidante dei polifenoli sarà analizzata mediante saggi in vitro e testando l'effetto protettivo contro lo stress ossidativo cellulare, avvalendosi delle analisi ABTS28 e DPPH29. Gli effetti antiossidanti saranno valutati direttamente a livello cellulare, in particolare saranno condotti esperimenti per conoscere la vitalità delle cellule di HepG2 (epatocarcinoma) dopo il trattamento con i polifenoli dell’olio, per misurare il danno cellulare e la generazione di ossigeno reattivo intracellulare.
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Università di Milano
Task 6.3 Impatto dei polifenoli EVO sul metabolismo del colesterolo
Verranno eseguiti esperimenti per valutare gli effetti dei polifenoli sul metabolismo del colesterolo.
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Università di Milano
Task 6.4 Meccanismi molecolari attraverso i quali gli acidi grassi (FFA) regolano la vitalità e la funzione delle cellule beta
Verranno studiati i meccanismi che permettono agli acidi grassi di regolare la vitalità e la funzione delle cellule beta, in modo da approfondire le conoscenze sulle insufficienze nelle persone con diabete, fondamentali per la prevenzione della malattia di tipo 2. I risultati ottenuti a seguito della sperimentazione sulle cellule verranno replicati utilizzando isole pancreatiche di topi ed esseri umani.
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DETO - Università di Bari Aldo Moro
Task 6.5 Studio degli effetti di diversi acidi grassi (FFA) sulle incretine nelle cellule beta pancreatiche
Sarà indagata la capacità di due acidi grassi, palmitato e oleato, di modulare la sensibilità alle incretine (ormoni prodotti a livello intestinale per un migliore controllo della glicemia) nelle cellule beta, per identificare i meccanismi molecolari. I risultati ottenuti a seguito della sperimentazione sulle cellule verranno replicati utilizzando isole pancreatiche di topi ed esseri umani.
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DETO - Università di Bari Aldo Moro
